استفاده از روش Nested-PCR ‌برای تشخیص آلودگی کشت‌های سلولی به ویروس pestivirus

نویسندگان

  • ترانه حاجیان گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
  • دینا مرشدی گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
  • سید علی قرشی گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
  • مرتضی دلیری جوپاری‌ گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
چکیده مقاله:

در این مطالعه یک روش Nested-PCR ‌برای تشخیص دو ویروس BVDV ‌از سویه NADL ‌بهینه سازی گردید. در آزمایش RT-PCR، قسمتی از منطقه غیر قابل ترجمه ناحیه ‌‌'5 ‌ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول PCR در وکتور R/T57pTZ کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تایید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انتخاب و آزمایش Nested-PCR ‌انجام گردید و یک قطعه DNA ‌به طول 155 جفت باز تکثیر شد. میزان حساسیت آزمایش RT-PCR، 50TCID 104 ‌و میزان حساسیت آزمایش Nested-PCR ‌در تشخیص ویروس BVDV در کشت سلول، 50TCID102 تعیین گردید. تعداد 7 نمونه از کشت‌های سلولی با سه روش PCR, ELISAو ‌ Nested-PCR ‌مورد آزمایش قرار گرفتند. نتایج نشان داد که حساسیت روش‌های مولکولی در تشخیص ویروس در نمونه‌ها نسبت به روش ELISA ‌بیشتر می‌باشد. ‌ ‌

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

استفاده از روش nested-pcr برای تشخیص آلودگی کشت های سلولی به ویروس pestivirus

در این مطالعه یک روش nested-pcr برای تشخیص دو ویروس bvdv از سویه nadl بهینه سازی گردید. در آزمایش rt-pcr، قسمتی از منطقه غیر قابل ترجمه ناحیه '5 ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول pcr در وکتور r/t57ptz کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تایید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انتخاب و آزمایش nested-pcr انجام گردید و یک قطعه dna به طول 155 جفت باز تکثیر شد. م...

متن کامل

شناسایی آلودگی مایکوپلاسمایی در کشتهای سلولی به روش PCRبا استفاده از پرایمرهای اختصاصی 16S rRNA

Introduction: Mycoplasmas are one of the most serious contaminants of cellular cultures and their biological productions. Mycoplasma diagnosis is conducted on the basis of culture and molecular methods. These methods are different from each other in terms of accuracy, reliability, and sensitivity. This study aimed to trace the mycoplasma contaminations in culture samples using 16S rRNA specific...

متن کامل

راه‌اندازی روش RT-Nested PCR به منظور تشخیص ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک

  چکید ه   سابقه و هدف   ویروس نقص ایمنی اکتسابی تیپ یک( HIV-1 ) عامل ایجاد کننده سندرم نقص ایمنی اکتسابی انسانی”ایدز” می‌باشد. انتقال بیماری از طریق انتقال خون در دوره پنجره، در مراکز انتقال خون یک معضل جهانی محسوب می‌شود. علاوه بر این، نیاز مبرمی برای تشخیص سریع، حساس و دقیق عفونت HIV-1 قبل از ظهور آنتی‌بادی در بدن فرد آلوده در بیمارستان‌ها و مراکز بهداشتی احساس می‌شود. تشخیص ژنوم ویروس HIV-1...

متن کامل

به کارگیری یک روش حساسrt-nested pcr برای تشخیص ویروس هپاتیت c

هدف: ویروس هپاتیت cیکی از مهمترین عوامل ایجاد کننده هپاتیت ویروسی به شمار می رود و تشخیص آن در نمونه های مشکوک از اهمیت بالایی برخوردار است. خطر انتقال عفونت ویروسی از طریق تزریق خون و فرآورده های آن ناشی از نقص روش های غربالگری سرولوژیک در تشخیص اهداکنندگان آلوده ای است که در دوره پنجره بیماری هستند. بنابراین تشخیص دقیق و به موقع عفونت hcvپیش از ظهور آنتی بادی در بدن فرد آلوده از اهمیت ویژه ای...

متن کامل

راه اندازی فن PCR برای تشخیص آلودگی به ویروس HTLV-1 در بافتهای پارافینه

Introduction: HTLV-1 , the first known human retrovirus belongs to oncovirus subfamily of retroviruses. The major characteristic of HTLV-1 is its highly restricted geographic prevalence. Northern part of Khorasan is an endemic region of HTLV-1 infection. Epidemiological studies can help in designing preventive programs for HTLV-1 infection. The aim of this study was the establishment of a PCR t...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 63  شماره 1

صفحات  11- 16

تاریخ انتشار 2008-03-20

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

کلمات کلیدی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023